Modèle murin d'une lignée cellulaire proneurale de gliome pour évaluer les thérapies anti-tumorales

Actualité 427 du 19/03/2013

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Article original J Neurooncol. 2013 16

Modèle murin d'une lignée cellulaire proneurale de gliome pour évaluer les thérapies anti-tumorales

Auteurs : Sonabend EST, Yun J, Lei L, Leung R, Soderquist C, Crisman C, Lamelle BJ, Carminucci UN, Sisti J, M Castelli, PAPA Sims, Bruce JN, Canoll P., Gabrielle Bartoli Cerveau Tumeur Laboratoire, Département de Neurochirurgie, Université de Columbia Centre Médical, 1130 St Nicolas Ave Rm. 1001, New York, NY, 10032, USA,.

Résumé :

Des sous-classes moléculaires de glioblastome (GBM) avec des altérations génétiques distinctes ont été identifiés. Il y a un besoin de modèles précliniques reproductibles, flexibles qui ressemblent aux phénotypes spécifiques des glioblastomes GBM pour faciliter, en préclinique, les tests de thérapies nouvelles. Nous présentons un modèle de lignée cellulaire murin proneural de glioblastome et nous examinons sa réponse à la radiothérapie. Les gliomes proneuraux ont été produits en injectant un rétrovirus PDGF-IRES-Cre dans la matière blanche subcorticale de souris adultes qui possèdent les gènes antitumoraux floxés Pten et p53 et défloxés. Les premières cultures cellulaires étaient bien générées par le rétrovirus qui a bien induit les tumeurs et a maintenu son activité in vitro par des passages multiples. L'analyse des séquence d'ARN des lignées cellulaires résultantes a bien été exécuté. Le potentiel tumorigène des cellules a été estimé par injection intracrânienne dans des souris nues adultes immunodéprimées. L'augmentation de la tumeur a été estimée par prise d'images après bioluminescence, BLI (bioluminescence Imaging). Les BLI pour les cellules tumorales et les coupes de cerveau ont été obtenus et ont été comparée aux BLI in vivo. La réponse à la radiothérapie entière de cerveau a été estimée dans les gliomes par portée d'animaux. L'injection intracrânienne de Pdgf+Pten-/-p53-/-luciferase+ cellules de gliome a conduit à la formation de tumeurs identiques aux glioblastomes GBM aec 100% d'efficacité (n = 48) et la tumorigenèse a été poursuivie pour plus de 3 générations. Les lignes cellulaires ont ressemblé spécifiquement au modèle proneural de glioblastome GBM, basé sur l'expression des séquences d'ARN. Pdgf+Pten-/-p53-/-luciferase+ainsi que le nombre de sellules a correspondu avec signal BLI. BLI d'une série a mesuré la croissance de la tumeur et a correspondu avec la taille et l'emplacement obtenu par prise d'images BLI in vivo. De plus, BLI a prédit la mortalité tumeur-apparentée avec un risque de 93% de mort dans les 5 jours qui ont suivi le signal BLI entre 1 × 108 et 5 × 108 cm2 photons/s. Le signal BLI avait une réponse considérable à la radiothérapie suivante qui a correspondu à un avantage de survie modeste pour les souris irradiées. L'injection Intracrânienne de cellules Pdgf+Pten-/-p53-/-luciferase+ constitue un modèle très reproductible, qui récapitule les traits caractéristiques des cellules proneural de glioblastome humain GBM, et peut être utilisé pour évaluer la croissance de la tumeur et la réponse à la thérapie.

Pubmed : 23504257

Vocabulaire :

Subcortical :
Sub veut dire sous et cortical, du cortex, c'est l'écorce cérébrale, la couche grise superficielle qui touche les méninges

Murin :
Relatif aux souris et aux rats, les essais précliniques se font sur des animaux, des souris nues, sans poils, immunodéprimées ou des rats.
Proneural : Du grec "pro", en avant et neural, neurone. Tout ce qui est avant le neurone fonctionnel, la neurogenèse, à partir d'une cellule souche neurale qui peut faire des neurones ou la glie.
Cre-Lox recombinaison : Technique utilisée pour effacer des modifications ou mutations génétiques. C'est une enzyme, la cre-recombinase qui cible de petites séquences d'ADN, les LoxP. Les LoxP sont présents sur quelques gènes, mais sur d'autres, ils sont absents et on peut par thérapie génique les insérer dans chaque gène. Le gène ne s'exprime pas tant que LoxP est mis en contact avec l'enzyme, la recombinase Cre.
Flox : C'est aujourd'hui une technique courante chez les souris, les rats et les petits mammifère. Le floxage des gènes est une modification génétique consistant à inclure une séquence transgénique, loxP qui permet lorsque cette séquence rencontre une enzyme, la convertase, de la mettre KO, de rendre le gène inactif. Cette action est conditionnelle, on peut par exemple rendre ce KO qu'à un emplacement et non au corps entier. Le défloxage n'a lieu qu'en présence, dans la même cellule, du gène floxé et de la recombinase Cre.